Framleiðsluferlið pólýakrýlamíð hlaup rafdráttar (PAGE) felur aðallega í sér skref eins og hlaup undirbúning, rafdrætti, litun og athugun á niðurstöðum.
Geltilbúningur Aðskilnaðargel (10%) undirbúningur: Blandið 0 ml af ddH₂O, 3 ml af 30% stofngeli, 5 ml af 5 mól/L Tris-HCl, 1 ml af 10% SDS og 1 ml af 10% AP, bætið við 10 μL af TEM, bætið við 10 μL af TEM, og bætið síðan við TEM, blandið vel saman. Helltu þessari blöndu á milli glerplöturnar, lokaðu toppnum með vatni og bíddu í 30~60 mínútur þar til hlaupið fjölliðaði alveg.
Staflagel (4%) undirbúningur: Blandið 4 ml af ddH2O, 33 ml af 30% stofngeli, 25 ml af 1 mól/L Tris-HCl, 0,2 ml af 10% SDS og 0,2 ml af 10% AP, bætið við 2 μL af TEMED og blandið strax vel. Hellið vatninu af aðskilnaðargelinu, bætið þessari blöndu út í og setjið greiða strax á milli glerplöturnar og bíðið í 15-30 mínútur þar til stöflunarhlaupið fjölliðar sig alveg.
Rafskautsaðgerð Sýnameðferð: Blandið sýninu saman við jafnmikið magn af 2XSDS hleðslubuffi, hitið við 100 gráður í 3-5 mínútur og skilið síðan í skilvindu við 12.000 rpm í 1 mínútu, og takið flotið til SDS-PAGE greiningar.
Hleðsla: Taktu 10 μL af framkölluðum og óframkölluðum sýnum og bættu þeim við sýnasafnið og bættu við 20 μL af próteinstöðlum með lágum mólþunga sem viðmiðun.
Rafdrætti: Bætið 1X rafdrættisbuffi við rafdrættistankinn, tengdu aflgjafa, haltu spennu stöflunarhlaupsins við 60V og spennu aðskilnaðargelsins við 100V. Þegar brómófenólblár nær botni rafskautstanksins skal stöðva rafskautið (um það bil 3 klst.).
Litun og athugun á niðurstöðu
Litun: Fjarlægðu hlaupið af glerplötunni og litaðu það með Coomassie Brilliant Blue litunarlausn í 4 til 6 klukkustundir við stofuhita. Aflitun: Settu litaða hlaupið í aflitunarlausn og litaðu það nokkrum sinnum þar til próteinbandið sést vel. Athugun á niðurstöðum: Eftir aflitun er hægt að mynda hlaupið og vista það. Eftir að aflitunarskrefinu er lokið skaltu setja hlaupið undir myndvinnslukerfið fyrir ljósmyndun og vista niðurstöðurnar á disklingi.